> ຂ່າວ > ຂ່າວອຸດສາຫະກໍາ

ເປັນຫຍັງການປູກຝັງຂອງເຊນຈຶ່ງ lyse ເມັດເລືອດແດງກ່ອນ?

2022-12-23

ແນະນໍາພື້ນຖານ
Erythrocyte lysate ແມ່ນຫນຶ່ງໃນວິທີທີ່ງ່າຍດາຍແລະງ່າຍດາຍທີ່ສຸດທີ່ຈະເອົາເມັດເລືອດແດງອອກ, ນັ້ນແມ່ນ, ການແຍກເມັດເລືອດແດງດ້ວຍ lysate, ເຊິ່ງບໍ່ທໍາລາຍຈຸລັງ nucleated ແລະສາມາດເອົາເມັດເລືອດແດງອອກໄດ້ຢ່າງສົມບູນ. Lysate cleavage ແມ່ນວິທີການກໍາຈັດເມັດເລືອດແດງອ່ອນໆ, ເຊິ່ງສ່ວນໃຫຍ່ແມ່ນໃຊ້ສໍາລັບການແຍກແລະການເຮັດຄວາມສະອາດຂອງຈຸລັງເນື້ອເຍື່ອທີ່ກະແຈກກະຈາຍໂດຍການຍ່ອຍອາຫານຂອງເອນໄຊ, ການແຍກແລະການຊໍາລະລ້າງ lymphocytes, ແລະການກໍາຈັດເມັດເລືອດແດງໃນການທົດລອງຂອງທາດໂປຼຕີນຈາກເນື້ອເຍື່ອແລະ nucleic. ການສະກັດເອົາອາຊິດ. ຈຸລັງເນື້ອເຍື່ອທີ່ໄດ້ຮັບໂດຍ lysate ຂອງເມັດເລືອດແດງບໍ່ມີເມັດເລືອດແດງ, ແລະສາມາດຖືກນໍາໃຊ້ຕື່ມອີກສໍາລັບວັດທະນະທໍາຂັ້ນຕົ້ນ, ການປະສົມປະສານຂອງເຊນ, ການໄຫຼຂອງ cytometry, ການແຍກແລະການສະກັດເອົາອາຊິດ nucleic ແລະທາດໂປຼຕີນ, ແລະອື່ນໆ.

ຄໍາແນະນໍາສໍາລັບການນໍາໃຊ້
ຕົວຢ່າງຈຸລັງຂອງຈຸລັງ
1. ເນື້ອເຍື່ອສົດຖືກຍ່ອຍໂດຍ pancreas/enzyme ຫຼື collagenase ແລະກະແຈກກະຈາຍເປັນ suspension ຈຸລັງດຽວ, ແລະ supernatant ໄດ້ຖືກຍົກເລີກໂດຍການ centrifugation.

2. ເອົາ ELS lysate ຈາກຕູ້ເຢັນໃນອຸນຫະພູມ 4â ¢ , ຕື່ມ ELS lysate ໃສ່ cell precipitate ໃນອັດຕາສ່ວນ 1:3-5 (ເພີ່ມ 3-5ml ຂອງ lysate ກັບ 1ml ຂອງ cell compacted), ຄ່ອຍໆແລະປະສົມ.

3. Centrifuge ຢູ່ທີ່ 800-1000rpm ສໍາລັບ 5-8 ນາທີແລະຖິ້ມຂອງແຫຼວສີແດງທີ່ຈະແຈ້ງເທິງ.

4. ສ່ວນທີ່ຕົກຄ້າງຖືກເກັບເອົາ ແລະ ບີບອັດດ້ວຍສານສະກັດຂອງ Hank ຫຼື ເຊລັມທີ່ບໍ່ມີເຊລັມ 2-3 ເທື່ອ.

5, ຖ້າຫາກວ່າການແຕກບໍ່ໄດ້ສໍາເລັດ / ສໍາເລັດສາມາດເຮັດໄດ້ຊ້ໍາຂັ້ນຕອນທີ 2 ແລະ 3.

6. ຈຸລັງ Resuspension ສໍາລັບການທົດລອງຕໍ່ໄປ; ຖ້າ RNA ຖືກສະກັດ, ມັນດີທີ່ສຸດທີ່ຈະເຮັດແນວນັ້ນໃນການແກ້ໄຂທີ່ກຽມໄວ້ຈາກຂັ້ນຕອນທີ 4 ໂດຍໃຊ້ນ້ໍາ DEPC

ເມັດເລືອດແດງມີວົງຈອນຊີວິດສັ້ນຫຼາຍ, ພຽງແຕ່ 120 ວັນ, ແຕ່ພວກມັນແຜ່ພັນເລືອດໄວຫຼາຍ, ແລະໃນກໍລະນີນີ້, ພວກມັນມີຄວາມສາມາດພິເສດໃນການແບ່ງຈຸລັງ, ແລະພວກມັນເປັນຈຸລັງທີ່ແບ່ງອອກໄວທີ່ສຸດ, ດັ່ງນັ້ນຈຸລັງນີ້ມີຄຸນຄ່າຫຼາຍ, ສະນັ້ນມັນເປັນປະໂຫຍດຫຼາຍສໍາລັບວັດທະນະທໍາເຊນ. ມັນງ່າຍດາຍຫຼາຍ, ມັນບໍ່ມີ organelles ໃນມັນ, ພຽງແຕ່ເຍື່ອຈຸລັງແລະທາດໂປຼຕີນ.

ທີ່ຜ່ານມາ:ຫນ້າທີ່ຂອງຊຸດ ELISA ມີຫຍັງແດ່?

ຕໍ່ໄປ:ຄວາມຕ້ອງການ Reagent ແລະການເປັນຕົວແທນພື້ນຖານຂອງຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງການແກ້ໄຂ.

ເປັນ​ຫຍັງ​ການ​ປູກ​ຝັງ​ຂອງ​ເຊນ​ຈຶ່ງ lyse ເມັດ​ເລືອດ​ແດງ​ກ່ອນ​?

ເປັນຫຍັງການປູກຝັງຂອງເຊນຈຶ່ງ lyse ເມັດເລືອດແດງກ່ອນ?